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本试剂盒是特别针对海洋动物的基因组提取试剂盒，已成功提取到鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物组织基因组DNA。无需酚/氯仿抽提，使用安全快捷方便，可最大限度去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

• 专用性强：专为针对海洋动物开发出来的专项产品。
  
• 操作时间短：1-2h左右即可获得高质量的海洋动物基因组DNA。
  
• 无毒害：无需使用酚氯仿等有害试剂，操作安全。
  
• 纯度高：可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

虾夷扇贝基因组提取，起始量：腮20mg，其余30mg，100μL洗脱，3μL上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min。Marker：λDNA/Hind III。	鲫鱼基因组DNA提取，起始量：腮20mg，肌肉30mg，100μL洗脱，3μL上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min；Marker：λDNA/Hind III。
虾肌肉组织基因组提取，起始量：30mg，100μL洗脱，3μL上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min；Marker：λDNA/Hind III。

• 若溶液产生沉淀，使用前可37℃水浴中预热10min以溶解沉淀。
  
• 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
  
• 若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
  
• 所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。

• 切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL GA缓冲液的离心管中，涡旋振荡15sec。
  注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。
  如果需要去除RNA，可加入4μL RNase A（100mg/mL）溶液（可选购货号：WH0217），振荡15sec，室温放置5min。
  
• 加入20μL Proteinase K （20mg/mL)溶液，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
  注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2h即可完成。扇贝组织0.5h基本可裂解完全，虾和鱼类组织1h。每小时振荡混合样品2～3次，每次振荡混匀15sec。
  
• 加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
  注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
  
• 加人200μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
  
• 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
  
• 向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm （~13400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
  
• 向吸附柱CB3中加入600μL漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
  
• 重复操作步骤7。
  
• 将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm（~13400×g)离心2min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
  
• 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液TE，室温放置2～5min，12000rpm （~13400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2min，12000rpm（~13400×g)离心2min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。